The insertion of bioactive peptides at the C-terminal end of an 11S globulin changes the structural stability and improves the antihypertensive activity

BACKGROUND: The 11S globulin from amaranth is the most abundant storage protein in mature seeds and is well recognized for its nutritional value. We used this globulin to engineer a new protein by adding a four valinetyrosine antihypertensive peptide at its C-terminal end to improve its functionality. The new protein was named AMR5 and expressed in the Escherichia coli BL21-CodonPlus(DE3)-RIL strain using a custom medium (F8PW) designed for this work. RESULTS: The alternative medium allowed for the production of 652 mg/L expressed protein at the flask level, mostly in an insoluble form, and this protein was subjected to in vitro refolding. The spectrometric analysis suggests that the protein adopts a ß/α structure with a small increment of α-helix conformation relative to the native amaranth 11S globulin. Thermal and urea denaturation experiments determined apparent Tm and C1/2 values of 50.4°C and 3.04 M, respectively, thus indicating that the antihypertensive peptide insertion destabilized the modified protein relative to the native one. AMR5 hydrolyzed by trypsin and chymotrypsin showed 14- and 1.3-fold stronger inhibitory activity against angiotensin I-converting enzyme (IC50 of 0.034 mg/mL) than the unmodified protein and the previously reported amaranth acidic subunit modified with antihypertensive peptides, respectively. CONCLUSION: The inserted peptide decreases the structural stability of amaranth 11S globulin and improves its antihypertensive activity.

Modulatory effect of quercetin on azathioprine induced membrane changes in the mouse spleen.

Modulatory effect of quercetin on azathioprine induced toxic changes was studied in spleen of experimental animals. Azathioprine treatment caused an increase in serum albumin/globin ratio and a decrease in total protein in spleen tissue. An increase in a membrane bound ATPases was also noted. Supplementation of quercetin with azathioprine increased the protein content and lowered the activities of membrane ATPase in spleen. There was a decrease in serum albumin globulin ratio. It was concluded that quercetin modulated the protein and membrane bound ATPase activities and protected the spleen from azathioprine induced membrane damage.

Estudio cinético de las proteínas en el traumatizado y su correlación con los índices predictivos / Kinetic study of proteins in the traumatized patient and its correlation with predictive indeces

Se realizó un estudio prospectivo en 52 lesionados, y se estableció la correlación existente entre los valores de los índices predictivos utilizados y los resultados obtenidos en las fracciones protéicas estudiadas al ingreso, 3 y 7 días. Fueron aplicadas las siguientes pruebas estadísticas: medias, desviación estándar, minímo, máximo y prueba de correlación-regresión e hipótesis con una confiabilidad de 95 por ciento (alfa =0,05). El 38,5 por ciento de los lesionados correspondieron al rango entre 21 y 30 años de edad y predominó el sexo masculino (88,5 por ciento). Los accidentes del tránsito constituyeron la causa más frecuente de lesiones (38,5 por ciento); las lesiones ortopédicas fueron las de mayor incidencia (26,4 por ciento) y se encontraron complicaciones en el 38,4 por ciento de la muestra. Las proteínas totales, las albúminas y las globulinas gamma sufrieron disminución significativa a las 72 horas de ocurridas las lesiones, esta depresión se hizo más intensa en los fallecidos y se constató que existe correlación entre las variables estudiadas y los índices predictivos

Avaliaçäo física, citológica, conteúdo de proteínas e determinaçäo qualitativa de globulinas do líquor de cäes normais e cäes com encefalite por cinomose / Cerebrospinal fluid physical, cytologycal and biochemical evaluation from clinically normal and distemper encephalitis affected dogs

O presente experimento teve como objetivos estabelecer padröes de referência para constituintes do líquido cefalorraquidiano de cäes normais e de cäes jovens portadores de encefalite por cinomose. Foram utilizados 40 animais, sendo 20 cäes normais (de seis a 48 meses de idade) e 20 cäes com cinomose (até 18 meses de idade). Os exames físico, citológico e bioquímico do líquor dos cäes normais permitiram o estabelecimento de valores para densidade: 1007 mais ou menos 1,83, pH: 8,30 mais ou menos 0,34, contagem global de hemácias: 6,65 mais ou menos 5,27/ul, contagem global de leucócitos: 2,85 mais ou menos 1,63/ul e dosagem de proteínas: 38,70 mais ou menos 15,49 mg/dl. Os exames físico, citológico e bioquímico do líquor de cäes com cinomose permitiram o estabelecimento de valores para densidade: 1010 mais ou menos 1,50, pH: 8,35 mais ou menos 0,46, contagem global de hemácias: 8,55 mais ou menos 6,48/ul, contagem global de leucócitos: 99,05 mais ou menos 106,93/ul e dosagem de proteínas: 219,03 mais ou menos 81,08 mg/dl. O líquor apresentou-se límpido e incolor em todas as amostras dos cäes normais e na maioria das amostras de cäes com cinomose. Algumas amostras dos cäes com cinomose encontravam-se discretamente turvas e/ou xantocrômicas. O teste de Pandy foi negativo em todas as amostras de cäes normais e positivo, variando de duas a três cruzes, nos animais com cinomose. A contagem diferencial de células do líquor de cäes com cinomose revelou uma predominância (67 por cento a 97 por cento) de linfócitos em todas as amostras, presença de 2 por cento a 24 por cento de monócitos e 2 por cento a 20 por cento de plasmócitos. Em algumas amostras observaram-se macrófagos, neutrófilos segmentados e células ependimárias. Verificou-se uma correlaçäo positiva entre o número de plasmócitos, os níveis protéicos totais e a taxa de globulinas do líquor de cäes com cinomose

Detección de títulos de anticuerpos, proteínas totales, albumina y globulinas en casos de leishmaniasis cutánea tratados con glucantime / Detection of antibody, total protein, albumin and globulin titles in cutaneous leishmaniasis patients treated with glucantime

1236 casos de LC mostraron desde 1 hasta 14 lesiones, más frecuentemente sobre los miembros superiores e inferiores del cuerpo y en los varones de más de 21 años de edad, con IDRM hasta 27 mm de induración y sin diferencias significativas entre esta reacción y del sexo, edad, número y tiempo de evolución de las lesiones. La relación entre el número de lesiones con la edad y el sexo fue significativa (x²=20,2: p< 0,05). El ensayo serológico en 550 muestras de suero con IFI y HAI fue positivo con TAc de 1:1024 antes del tratamiento con glucantime IM, con disminución y negativización durante y después del tratamiento respectivamente, sin diferencias significativas estadísticamente entre las reacciones serológicas ensayadas. En 284 de los casos con LC el promedio de PT fue de 7,4 (DE=0,68 g/dl) valor que se redujo a 5,6 (DE=0,51 g/dl) al terminar al aplicación del glucantime. Los niveles de A variaron entre 3,2 g/dl y 6,6 g/dl, en dos casos el valor de A fue de 9,4 g/dl con 5,4 g/dl de G, niveles que podrían asociarse con el aumento de PT, estas variaciones también detectadas por la reacción electroforética así como la reducción de A/G estarían relacionadas con el aumento de las globulinas alfa y beta en estos casos